寫在起始：鑒于有些新入行做原料藥的同學(xué)對化合物的純化方法了解的較少，研究過程中不知該如何純化目標(biāo)產(chǎn)品，故根據(jù)個(gè)人幾年工作經(jīng)歷，對實(shí)驗(yàn)室中接觸到的常用純化方法進(jìn)行小小的總結(jié) 實(shí)驗(yàn)室中常用的純化手段

　做新藥仿制藥研發(fā)過程中工藝占很大比重，做工藝較多的同學(xué)們都會遇到這樣的問題，我好不容易把產(chǎn)品合成出來了，結(jié)果純度達(dá)不到要求，一個(gè)純化占據(jù)了大部分的研發(fā)時(shí)間，面對主管領(lǐng)導(dǎo)期盼的雙眼、猙獰的面孔，恨不得能化身超體中的女神斯嘉麗進(jìn)入分子位面用手抓出雜質(zhì)扔進(jìn)垃圾堆。

　 說正事，常用的純化主要分為重結(jié)晶純化及其它純化；其它純化包含的內(nèi)容比較多，比如打漿、過柱、吸附等。

　 1. 實(shí)驗(yàn)室主要重結(jié)晶純化操作 先說說重結(jié)晶，重結(jié)晶一般操作為冷卻結(jié)晶、溶析結(jié)晶（也叫反溶劑結(jié)晶）、蒸發(fā)結(jié)晶、熔融結(jié)晶等，前兩種屬于溶液結(jié)晶的內(nèi)容，而熔融結(jié)晶主要在分離異構(gòu)體等文獻(xiàn)中較多，可憐我就知道手性拆分，到現(xiàn)在還沒接觸過熔融結(jié)晶。

　 1.1 冷卻結(jié)晶：將待純化產(chǎn)品加入某一溶劑中加熱至溶清后再降溫析晶的過程稱為冷卻結(jié)晶。

　常說的冷卻重結(jié)晶一般操作為將粗品與適當(dāng)?shù)娜軇┘訜嶂寥芙�，趁熱過濾（如不需要除機(jī)械雜質(zhì)則該步略去），降溫析晶，過濾干燥。冷卻結(jié)晶應(yīng)

　該是大家使用最多的了，這一條中包含溶劑選擇的原則相信同學(xué)們接觸的也最多，我就少水點(diǎn)字?jǐn)?shù)吧。

　選擇適宜的溶劑是重結(jié)晶的關(guān)鍵之一，適宜的試劑應(yīng)符合下述條件：

�。�1）與被提純的化合物不起化學(xué)作用（這句是廢話）。

�。�2）化合物應(yīng)易溶于熱溶劑中，而在冷溶劑中幾乎不溶；反向也有，沒接觸過。

�。�3）對雜質(zhì)的溶解度應(yīng)很大或很小。

�。�4）能得到較好的晶體，當(dāng)然無定型也有，有時(shí)還得多加個(gè)轉(zhuǎn)晶型過程。

�。�5）溶劑的沸點(diǎn)適中。過低則溶解度改變不大，難分離，操作也困難；過高則溶劑不易除去造成溶劑殘留超標(biāo)。

�。�6）單一溶劑優(yōu)先，三類溶劑優(yōu)先，操作安全優(yōu)先（避免低閃點(diǎn)溶劑）。

　 在選擇溶劑時(shí)應(yīng)根據(jù)“相似相溶”的一般原理。溶質(zhì)往往易溶于其結(jié)構(gòu)相似的溶劑中。一般來說，極性的溶劑溶解極性的固體，非極性的溶劑溶解非極性的固體。在實(shí)驗(yàn)中往往要通過很多次實(shí)驗(yàn)才能確定使用哪一種溶劑（好像也是廢話）。

　 一句話，重結(jié)晶溶劑的選擇一般原則是對粗產(chǎn)品的熱溶解度大，冷溶解度小，對雜質(zhì)溶解性冷熱都大或者冷熱都小，產(chǎn)品在重結(jié)晶溫度下穩(wěn)定性要

　好；溶劑的沸點(diǎn)不宜過高或過低，主要利用產(chǎn)品與雜質(zhì)在不同溶劑中溶解度的差異選擇目標(biāo)溶劑。

　1.2 反溶劑結(jié)晶：將待純化產(chǎn)品 用某一良溶劑溶解，再向其中加入不良溶劑析出產(chǎn)品的過程。

　反溶劑結(jié)晶也稱作抽提結(jié)晶，多用于制藥行業(yè)。反溶劑結(jié)晶法是將良溶劑（也稱為正溶劑）與不良溶劑(即反溶劑)結(jié)合使用，通過添加不良溶劑降低待結(jié)晶物在溶劑中的溶解度達(dá)到析晶純化的目的。

　反溶劑結(jié)晶有兩個(gè)原則：①正反溶劑要相溶，②待重結(jié)晶物溶于正溶劑，不溶于或微溶于不良溶劑。

　 反溶劑結(jié)晶說起來簡單輕松，但實(shí)際操作起來也挺復(fù)雜，一是正反溶劑的選擇要經(jīng)過大量篩選；二是正反溶劑的用量，良溶劑不能太多不然產(chǎn)品損失大，不良溶劑的量也很頭疼，加多了沒純化效果，加少了損失又太大，還是要多做用量篩選。

　 1.3 蒸發(fā)結(jié)晶：將待純化產(chǎn)品溶解后自然揮發(fā)或蒸除大部分溶劑以析出產(chǎn)品的過程。

　說到蒸發(fā)結(jié)晶，不得不提起一段悲傷的回憶，當(dāng)年組長讓我把化合物溶了旋蒸純化下，當(dāng)時(shí)我是一臉的呆傻，這特么咋純化，然后糾結(jié)了半天問組長咋做（為啥糾結(jié)？我覺得組長太丑），組長直接發(fā)過來十幾篇結(jié)晶文獻(xiàn)讓我仔細(xì)看，完了還特么抽查學(xué)習(xí)成果- -！

　說正事，蒸發(fā)結(jié)晶一般是待純化物溶了后通過旋蒸或常壓蒸餾去除大部分溶劑，過程中會優(yōu)先析出純度較高的產(chǎn)品，待剩余溶劑較少后直接抽濾，大部分雜質(zhì)會隨著母液一起分離。另外晶型研究中可用于單晶培養(yǎng)、無定型晶種制備等，就是把化合物溶清過濾后靜置緩慢揮發(fā)。

　2. 常用其他純化操作 2.1 打漿純化

　這個(gè)沒什么說的，就是找到利用雜質(zhì)和產(chǎn)品在某一溶劑中溶解度的不同進(jìn)行打漿除雜，打漿操作一般以去除液體反應(yīng)殘留物料或難干燥溶劑較多。

　 2.2 柱層析純化

　上面還說有一把 40 米大刀呢，這會兒又提到柱層析了，不過我臉皮厚，盡管批評我吧！

　 說實(shí)話，做新藥及仿制藥滿打滿算四年多了，原料藥工藝中需要過柱的只見過一次，唯一的那個(gè)項(xiàng)目也僅是過快速柱除雜的思路。不能否認(rèn)柱層析的純化效果，但是原料藥項(xiàng)目如果使用柱層析純化會消耗大量溶劑產(chǎn)生大量的廢液，其生產(chǎn)成本太高。所以研究階段應(yīng)盡量避免柱層析，實(shí)在繞不過去最好能改用過快速柱法純化。

　2.3 成鹽及解離、更改鹽形式純化

　 將待純化產(chǎn)品在溶解狀態(tài)下成鹽后再解離，或改變產(chǎn)品鹽基用以去除大部分雜質(zhì)的操作。

　 這一條手性拆分用的應(yīng)該是最多的了。由于鹽形式的變化會顯著影響溶解度，因此這是另一種有用的結(jié)晶技術(shù)。舉例來說，目標(biāo)化合物可能在所選溶劑中溶解度低。但成鹽后，它的溶解度顯著變大并能完全溶解。冷卻和反溶劑結(jié)晶都可以得到純的目標(biāo)化合物的鹽。另一種情況是，目標(biāo)化合物能溶解在所選溶劑中，而成鹽后在此溶劑中的溶解度低。

　 2.4 酸堿析晶純化

　將待純化產(chǎn)品調(diào)酸堿后溶于水中，再反向調(diào) PH 析出產(chǎn)品的過程。該方法對于易溶于水的雜質(zhì)去除效果極佳。

　2.5 活性炭或硅膠或硅藻土吸附純化

　活性炭吸附、硅膠吸附除雜主要操作為將待純化產(chǎn)品在某一溶劑中加熱溶清后再加活性炭或硅膠，攪拌一定時(shí)間后趁熱過濾，母液降溫析晶即可。其中活性炭及硅膠的添加量一般是 1-5%。該純化法能去除吸附性較好的雜

　質(zhì)，還能順便脫個(gè)色。當(dāng)然，如果硅膠或活性炭對產(chǎn)品的吸附性也很好，那收率就會降低好多。

　硅藻土其主要成分與硅膠類似，常用于溶清待純化產(chǎn)品抽濾前的鋪墊。一般的操作為將待純化產(chǎn)品溶清后，將硅藻土或硅膠鋪墊于漏斗上再進(jìn)行抽濾，其實(shí)說白了就是一個(gè)過快速短柱的辦法，該方法對大極性雜質(zhì)及鈀等重金屬的去除效果較好，至于其它雜質(zhì)那得看它心情了。

　 2.6 制備分離（正反相制備或 HPLC 制備）

　制備分離一般是利用液相收集特定峰，常用于雜質(zhì)研究過程。

　這一條絕對是合成人員的最愛了，雜質(zhì)研究過程中因?yàn)榉蛛x及合成的雜質(zhì)量都比較少，要將雜質(zhì)提純最好的方法莫過于制備分離了，樣品送給分析人員然后坐等雜質(zhì)分離收集好豈不美滋滋。條件好的公司一般都會配備，沒條件的？那只能手動(dòng)過小柱子了。

　2.7 薄層色譜分離 一句話，刮小板或刮大板（你懂的），一般在雜質(zhì)研究及制備中常用，畢竟一塊大板最多也就涂 20mg 待分離產(chǎn)品。

　2.8 蒸餾和精餾操作 蒸餾是一種分離液體混合物的方法；精餾是多次簡單蒸餾的組合。精餾是蒸餾的一部分，一般用于幾個(gè)組分的分離，主要是異構(gòu)體分離。其實(shí)吧可以簡單點(diǎn)理解，有回流操作的蒸餾是精餾，沒有回流的只是蒸餾。

　說到蒸餾，真的是比過柱子純化效果還好，可惜局限性太大。常用于油狀中間體的純化。

　2.8 干燥（鼓風(fēng)、真空、凍干）

　沒錯(cuò)，干燥也是純化的一種手段，有效的干燥方式能將溶劑殘留控制在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，比較難以去除的溶劑如甲苯、乙腈等，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中限度都很低，烘干方式、溫度、時(shí)長等都會對去除效果有很大影響，所以對干燥條件的考察也很重要。這段是水字?jǐn)?shù)的，可以略過。什么？你說我為啥不寫前面？我才不告訴你！

　寫在結(jié)尾：

　由于筆者水平有限，經(jīng)驗(yàn)不足，寫的很粗略淺顯，歡迎大家來微信藥事縱橫合成群交流探討。

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