廣西菲牛蛭藥材的高效毛細管電泳指紋圖譜研究
發(fā)布時間:2019-08-27 來源: 散文精選 點擊:
?[關鍵詞]高效毛細管電泳;指紋圖譜;菲牛蛭??
菲牛蛭Poecilobdella manillensis別名馬尼擬醫(yī)蛭,俗稱金邊螞蝗,隸屬于無吻蛭目、醫(yī)蛭科、牛蛭屬,主要分布于廣西、廣東、海南和福建等省區(qū)[1],野生資源豐富并且可以進行人工養(yǎng)殖[2],其具有顯著的抗凝血、抗血栓、溶栓、抗血小板聚集活性[3-5],主要化學成分為脂肪酸、氨基酸和蛋白質[6-7],其中以報道的活性成分為菲牛蛭素A和菲牛蛭素B[7] 、水蛭素P6、水蛭素P18[8],迄今為止作者未見任何關于指紋圖譜的報道,高效毛細管電泳技術廣泛應用于脂肪酸、氨基酸和蛋白質的分離、分析、鑒定,所以本實驗采用高效毛細管電泳法對菲牛蛭藥材進行了指紋圖譜研究,并同時對其抗凝血酶活性進行了測定。?
1.儀器與試藥
Beckman Coulter P/ACETM MDQ毛細管電泳儀(美國BECKMAN COULTER公司),配有PDA檢測器與控溫系統(tǒng),儀器控制與數據采集通過Beckman 32 Karat 5.0工作站進行;未涂層石英毛細管(75 μm×56 cm,河北永年銳灃色譜器件有限公司);PH計(PHS-3C,上海精密科學儀器有限公司);KQ5200B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);分析天平(AG135,METTLER TO-LEDO);LXJ-ⅡB低速大容量多管離心機(上海安亭科學儀器廠);定時可調速漩渦混合器(XW-01,上海醫(yī)大儀器廠);恒溫水浴鍋(DK-S26,上海精宏實驗設備有限公司)。
磷酸氫二鈉(分析純,批號 1200645,天津市科密歐化學試劑有限公司);三羥甲基氨基甲烷(Tris,純度≥99.9%,批號 1004053,河北博海生物工程開發(fā)公司);十二烷基硫酸鈉(SDS,分析純,批號 1003032,河北博海生物工程開發(fā)公司);氫氧化鈉(分析純,批號 20100621,北京化工廠);鹽酸(分析純,批號 20100128,北京化工廠);甲醇(色譜級,F(xiàn)isher);實驗用水為超純水。
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