茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2019-09-02 來源: 日記大全 點(diǎn)擊:
摘 要:茶對(duì)人體具有降三高、減肥、提神、防老年癡呆癥等功效。然而學(xué)校大多數(shù)同學(xué)在口渴的情況下選擇喝茶葉水人數(shù)比例只占12.3%。因此,研究喝茶可能提高記憶能力、飲茶是否對(duì)青少年智力發(fā)展具有幫助具有意義。本文通過3項(xiàng)實(shí)驗(yàn),分別分析了不同配比的茶葉浸提液中茶多酚的含量測(cè)定,不同加工方式的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,不同濃度的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,最終喝茶對(duì)青少年智力發(fā)展具有一定作用的結(jié)論。
關(guān)鍵詞:茶葉浸提液;小鼠;學(xué)習(xí);記憶能力;影響
中圖分類號(hào):R944.26 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20160832075
緒論
資料[1-2]表明,長期飲用碳酸飲料容易引起肥胖、糖尿病、骨質(zhì)疏松等癥。通過調(diào)查問卷方式了解到在口渴情況下大多數(shù)同學(xué)是喝白開水,喝茶葉水(簡(jiǎn)稱喝茶)比例只有12.3%。茶,是中華民族的舉國之飲,中國幾千年的飲茶史,足以證明飲茶的重要性。有資料[3]表明,茶葉中有益的成份主要是茶多酚和茶多糖,喝茶對(duì)人體有許多益處:如降血糖、降血壓、降血脂,可減肥、提神等,還可以防老年癡呆癥。
老年癡呆癥的癥狀之一是漸進(jìn)式記憶障礙,而記憶能力是智力的重要組成,對(duì)學(xué)習(xí)能力影響非常大。青少年時(shí)期是一個(gè)人智力發(fā)展的高峰期,在國家提倡大健康的背景下,飲茶能否對(duì)青少年智力發(fā)展提供有益的幫助,這是值得研究的問題。通過查閱文獻(xiàn),相關(guān)研究資料很少。因此決定建立“茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究”課題,對(duì)該問題進(jìn)行研究。
1 材料和方法
課題組從2015年9月—2016年2月,利用課余、節(jié)假日,進(jìn)行了以下3項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究,分別是不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測(cè)定、不同加工方式的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響、不同濃度的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
1.1 實(shí)驗(yàn)1
不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測(cè)定
1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
本實(shí)驗(yàn)材料采用按制造工藝分類的茶葉,即紅茶和綠茶,采用市場(chǎng)上常見的品牌和產(chǎn)地茶葉。實(shí)驗(yàn)使用的綠茶為一級(jí)的龍井茶,產(chǎn)地是浙江杭州錢塘產(chǎn)區(qū),產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為GB/T18650 ,廠商是杭州憶江南茶業(yè)有限公司;紅茶則為一級(jí)大紅袍,原料產(chǎn)地為云南臨滄,而產(chǎn)地則是福建漳州,產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為GB/T13738.2,廠商是漳州天福茶業(yè)有限公司。另外,本次實(shí)驗(yàn)還用到了購買于上海金穗生物科技有限公司的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)品(含量≥98%)、 KMnO4溶液、3moL/L H2SO4溶液、鄰二氮菲亞鐵指示劑(0.025moL/L)等。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)樣品配置
茶葉浸提液配比時(shí),統(tǒng)一使用75mL的沸水,通過控制茶葉的重量來提取不同濃度的茶葉浸提取液。具體是分別將0.75g、0.83g、0.94g、1.07g、1.25g、1.50g、1.88克、2.50g、3.75g、7.50g的茶葉放入75mL的沸水中浸泡10min,得到配比為1:100、1:90、1:80、1:70、1:60、1:50、1:40、1:30、1:20、1:10的浸提液。
1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
在本次實(shí)驗(yàn)中主要采用的是高錳酸鉀滴定法[5],用于測(cè)定各樣品中茶多酚的含量。
1.2 實(shí)驗(yàn)2
不同加工方式的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
本次實(shí)驗(yàn)使用的動(dòng)物是ICR雄性小鼠,鼠齡3周(浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購得,許可證號(hào):scxk(浙)2008-0033),飼料是由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)基地、浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心共同制造的,執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為GB14924-2001。另外,墊料是經(jīng)121℃、30min高壓蒸汽滅菌木質(zhì)刨花,浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購得,綠茶和紅茶與實(shí)驗(yàn)一的相同。
1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
實(shí)驗(yàn)分為3組,分別為:對(duì)照1組——小鼠11只,飲用水為去氯自來水(存放24h后自來水);綠茶組——小鼠15只,飲用水為配比1:30的綠茶浸提液;紅茶組——小鼠15只,飲用水為配比1:30的紅茶浸提液。3組小鼠其它生活條件相同。根據(jù)文獻(xiàn)[4]和人們的喝茶習(xí)慣,本實(shí)驗(yàn)采用配比為1:30的茶葉浸提液。
1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.3.1 觀察法
觀察法主要指的是在學(xué)校實(shí)驗(yàn)室,小鼠自由攝食,飲水,飼養(yǎng)觀察35d,每天觀察小鼠活動(dòng)情況,記錄小鼠飲水量,攝食量,每周稱量小鼠體重。
1.2.3.2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
在飼養(yǎng)35d后,小鼠在水迷宮實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)3d,進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分為“定位航行”和“空間搜索”2部分,定位航行實(shí)驗(yàn)4d,每天記錄小鼠潛伏期;空間搜索實(shí)驗(yàn)1d,記錄小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)和Ⅰ象限的時(shí)間,通過這些數(shù)據(jù)來測(cè)試小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
1.2.3.3 生化指標(biāo)檢測(cè)
水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,解剖小鼠,提取腦組織,檢測(cè)腦組織丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。主要包括MDA含量測(cè)定和SOD活性測(cè)定,其中MDA含量測(cè)定主要采用的是硫代巴比妥酸(TBA)法[6],操作步驟按MDA測(cè)定試劑盒說明操作,而SOD活性測(cè)定則是采用WST-1法[7],按SOD測(cè)試盒說明操作。
1.3 實(shí)驗(yàn)3
不同濃度的茶葉浸提液對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
1.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
本實(shí)驗(yàn)采用的實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)二的相同
1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組為
對(duì)照2組——10只,飲用水為去氯自來水(存放24h后自來水);綠茶組(1:10)——10只,飲用水為配比1:10的綠茶浸提液;綠茶組(1:30)——10只,飲用水為配比1:30的綠茶浸提液;綠茶組(1:100)——10只,飲用水為配比1:100的綠茶浸提液;紅茶組(1:10)——10只,飲用水為配比1:10的紅茶浸提液;紅茶組(1:30)——10只,飲用水為配比1:30的紅茶浸提液;紅茶組(1:100)——10只,飲用水為配比1:100的紅茶浸提液。
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