摘 要：為建立高效液相色譜法測(cè)定迷迭香中鼠尾草酸含量的方法，以乙腈-0.1%磷酸水（60∶40）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm；柱溫30℃，等度洗脫，流速為1.0 mL/min。結(jié)果顯示，鼠尾草酸在0.277 2～1.016 4 mg/mL范圍具有良好的線(xiàn)性關(guān)系（R2=0.999 92），回收率為97.56%。該方法快速、靈敏、準(zhǔn)確，目標(biāo)峰分離度良好，可為迷迭香藥材以及提取物的質(zhì)量控制提供依據(jù)。
　　關(guān)鍵詞：高效液相色譜；迷迭香；鼠尾草酸
　　中圖分類(lèi)號(hào)：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-060X（2016）10-0087-02
　　Abstract：To establish a HPLC method for the determination of carnosic acid in Rosemarinus officimalis L.， the anaiysis was carried out on Pheromenex Ecosil C18 column （200 mm ×4.6 mm，5 μm）， the mobile phase was composed of actonitrile and 0.1% phosphoric acid aqucous （60∶40， v/v）.The detection wavelength was 210 nm， with flow rate 1.0 mL/min at column temperature of 30 ℃.The standard curve of linear relationship was of 0.277 2-1.016 4 mg/mL and R2=0.999 92， average recovery was 97.56%. The method was accurate， sensitive， simple and reliable for the determination of carnosic acid in Rosemarinus oficinalis L.， suitable for the quality evaluation of Rosemarinus officinalis L.
　　Key words： HPLC； Rosemarinus officinalis L.； carnosic acid
　　迷迭香（Rosmarinus officinalis L.），別名艾菊，系唇形科迷迭香（Rosmarinus）屬植物[1]，味辛、性溫，原產(chǎn)于歐洲、北非以及地中海等地區(qū)，在中國(guó)云南、貴州和新疆等地有廣泛種植[2-3]�，F(xiàn)代研究表明，鼠尾草酸（Carnosic acid，簡(jiǎn)稱(chēng)CA）是迷迭香中抗氧化能力最強(qiáng)的活性成分[4-5]，含量一般在2.2%～3.1%[4-5]，作為一種安全無(wú)毒副作用的高效純天然抗氧化劑，廣泛應(yīng)用于化妝品、各種植物油脂、肉制品、調(diào)味品、油炸食品、烘培食品等領(lǐng)域[6-7]，具有極大的市場(chǎng)需求和潛力，預(yù)計(jì)到2020年，迷迭香提取物市場(chǎng)需求將突破1萬(wàn)t。因此，建立高效、穩(wěn)定、可靠的迷迭香鼠尾草酸檢測(cè)方法，從資源、產(chǎn)品等方面進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，對(duì)保障迷迭香深度開(kāi)發(fā)具有重要意義。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)迷迭香中鼠尾草酸的含量測(cè)定，主要有高效液相色譜、紫外分光光度法、氣相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法[8-11]，其中高效液相色譜法主要采用梯度洗脫法，但由于鼠尾草酸的最大紫外吸收波長(zhǎng)位于230 nm左右，接近常規(guī)流動(dòng)相的紫外截止波長(zhǎng)，而常規(guī)液相色譜儀在梯度洗脫中又無(wú)法扣除流動(dòng)相的本底吸收，容易造成基線(xiàn)漂移，并導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性受到一定的影響，對(duì)高效液相色譜儀的選擇要求也較高，一定程度上制約了這些方法的廣普應(yīng)用。試驗(yàn)以乙腈-0.1%磷酸水為流動(dòng)相，建立迷迭香中鼠尾草酸的HPLC等度洗脫方法，有效地解決了上述問(wèn)題，且檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定、可靠、高效，具有較好的廣普性，為迷迭香中鼠尾草酸的開(kāi)發(fā)利用提供了有力的理論依據(jù)。
　　1 材料與方法
　　1.1 儀器與設(shè)備
　　高效液相色譜儀（紫外檢測(cè)器），日本島津；色譜柱C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司（KQ3200B）；電子天平（METTLER AE240）。
　　1.2 藥材與試劑
　　迷迭香藥材由湖南三福生物科技有限公司提供，鼠尾草酸標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)于美國(guó)Sigma-Aldrich公司。乙腈為色譜純，購(gòu)于美國(guó)Spectrum公司；其余試劑均為分析純，廣州國(guó)藥集團(tuán)。
　　1.3 色譜條件
　　流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸水（60∶40，v/v）；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20 μL。
　　1.4 供試品溶液的制備
　　迷迭香葉片除沙石等機(jī)械雜質(zhì)后進(jìn)行切斷處理（約1 cm），自然陰干后粉碎，并過(guò)20目藥篩。精密稱(chēng)取迷迭香粉末21.8 mg，置50 mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇40 mL，超聲處理20 min，待冷卻加無(wú)水乙醇定容至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45 μm）過(guò)濾，備用。
　　1.5 對(duì)照品溶液的制備
　　精密稱(chēng)定鼠尾草酸對(duì)照品10.05 mg，置于10 mL棕色容量瓶中，加少量的無(wú)水乙醇超聲溶解，待冷卻后定容，搖勻，用微孔濾膜（0.45 μm）過(guò)濾，備用。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 色譜條件的優(yōu)化
　　精密量取適量標(biāo)準(zhǔn)溶液流動(dòng)相溶解后，在190～500 nm進(jìn)行全波長(zhǎng)紫外掃描。結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)溶液的鼠尾草酸在230、280和331 nm各有1個(gè)吸收峰（圖1）。其中230 nm是其最大吸收波長(zhǎng)，靈敏度高，重現(xiàn)性好；同時(shí)在230 nm處樣品譜圖中雜質(zhì)干擾較少，因此選用230 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。鼠尾草酸在17 min左右出峰，峰形良好，靈敏度高，重現(xiàn)性好，樣品中鼠尾草酸的峰形及與其他雜峰的分離度最為理想（圖1）。

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