[摘要] 建立同時測定野菊花藥材中綠原酸、咖啡酸、1，3-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡�？鼘幩�、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3，4-二咖啡�？鼘幩�、蒙花苷及木犀草素等8 種成分含量的方法。采用HPLC，Shim pack VP-ODS色譜柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）；以甲醇（A）-0.3%磷酸水溶液（B）為流動相，梯度洗脫，流速1.0 mL·min^-1；檢測波長326 nm；柱溫35 ℃。8種成分在40 min內(nèi)均達(dá)到基線分離，線性關(guān)系良好（r>0.999 5， n=7）；平均回收率均在97.03%～102.3% （RSD<2.0%，n=6）。結(jié)果表明該方法操作簡單，準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性良好，為野菊花藥材的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　[關(guān)鍵詞] 野菊花；高效液相色譜法；黃酮；有機(jī)酸；含量測定；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
　　野菊花為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序，具有清熱解毒、疏風(fēng)平肝之功效，用于疔瘡、癰腫、丹毒、風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、高血壓、眩暈、頭痛等。野菊花中富含黃酮類、有機(jī)酸類、萜類、揮發(fā)油等化學(xué)成分^[1]。1，3-二咖啡�？鼘幩�、3，5-二咖啡�？鼘幩�、3，4-二咖啡�？鼘幩崾潜菊n題組從野菊花中分得的3個活性成分。藥理研究表明咖啡�？鼘幩犷惓煞志哂休^好的抗炎、抗氧化、抗菌等作用^[2]，與野菊花的藥理活性相一致。目前，已有報道對野菊花藥材及其提取物中的單一或多種成分進(jìn)行定量分析^[3-5]，采用HPLC同時測定野菊花中 8 種黃酮類和有機(jī)酸類成分（綠原酸、咖啡酸、1，3-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡�？鼘幩�、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3，4-二咖啡酰奎寧酸、蒙花苷及木犀草素）尚屬首次。本研究對不同產(chǎn)地野菊花藥材中8種成分進(jìn)行含量分析，為提升野菊花藥材的質(zhì)量控制方法提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　1 材料
　　Shimadzu LC-20A高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；BP211D型電子天平（1/10萬，德國Sartarius公司）；Milli-Q超純水機(jī)（美國 Millipore公司）；KQ-500E型醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；8453型紫外-可見分光光度計(jì)（美國Agilent公司）；中藥粉碎機(jī)（瑞安市永歷制藥機(jī)械有限公司）。
　　對照品綠原酸（批號 110753-200413）、咖啡酸（批號 110885-200102）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（批號 111720-200604）、蒙花苷（批號 111528-200303）、木犀草素（批號 111520-200201）均購自中國食品藥品檢定研究院。對照品1，3-二咖啡�？鼘幩帷�3，5-二咖啡�？鼘幩�、3，4-二咖啡�？鼘幩嵊杀締挝惶烊凰幬锘瘜W(xué)室分離得到，經(jīng)HPLC峰面積歸一化法測定其純度大于98.0%；甲醇（色譜純，天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）、乙腈（色譜純，TEDIA，USA），醋酸（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司）、磷酸（分析純，上海蘇懿化學(xué)試劑有限公司）。
　　5批野菊花藥材分別購于南京醫(yī)藥合肥大藥房連鎖有限公司（批號 20120806）、合肥國大藥房（批號20110901）、合肥百姓緣大藥房（批號 20120301）、合肥北京同仁堂合肥藥店（批號 200007937）和合肥德康大藥房（批號 20120622），其產(chǎn)地分別為安徽、湖北、湖南、河北和山西，經(jīng)安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院中藥學(xué)教研室張群林副教授鑒定為Ch. indicum的干燥頭狀花序。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 色譜條件 Shim pack VP-ODS色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相A為醇，B為0.3%磷酸水溶液。梯度洗脫，0～9 min，B 85%～80%；9～12 min，B 80%～70%；12～15 min，B 70%～65%；15～20 min，B 65%～60%；20～23min，B 60%～55%；23～29 min，B 55%～54%；29～32 min，B 54%～45%；32～37 min，B 45%～5%；37～45 min，B 5%。流速1.0 mL·min^-1，檢測波長326 nm，進(jìn)樣量20 μL，柱溫為35 ℃。在上述色譜條件下8種成分與其他共存峰得到很好的分離，分離度均大于1.5，理論塔板數(shù)均大于1萬。見圖1。
　　2.2 對照品溶液配制 分別精密稱取綠原酸2.05 mg，咖啡酸1.22 mg，1，3-二咖啡酰奎寧酸1.56 mg，3，5-二咖啡酰奎寧酸1.52 mg，木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷2.24 mg，3，4-二咖啡�？鼘幩�2.07 mg，蒙花苷2.51 mg，木犀草素2.08 mg置5 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，即得綠原酸0.410 g·L^-1，咖啡酸0.244 g·L^-1，1，3-二咖啡�？鼘幩�0.312 g·L^-1，3，5-二咖啡�？鼘幩�0.304 g·L^-1，木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 0.448 g·L^-1， 3，4-二咖啡�？鼘幩� 0.414 g·L^-1， 蒙花苷 0.502 g·L^-1，木犀草素0.416 g·L^-1的對照品貯備液。分別精密量取2.5 mL綠原酸，0.25 mL咖啡酸，1.0 mL 1，3-二咖啡酰奎寧酸，2 mL 3，5-二咖啡�？鼘幩�，0.5 mL木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，1.0 mL 3，4-二咖啡�？鼘幩幔�2.0 mL蒙花苷和0. 5 mL木犀草素對照品溶液，置10 mL量瓶中，定容至刻度，即得到混合對照品溶液。

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