摘 要：通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)假煙葉樹(shù)葉中的多酚物質(zhì)提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，各因素對(duì)假煙葉樹(shù)葉中多酚物質(zhì)提取效果的影響從大到小排列依次為：乙醇濃度>固液比>提取時(shí)間>提取溫度；最佳提取工藝為：乙醇濃度40%、提取溫度90℃、固液比1︰30、提取時(shí)間1.0 h，連續(xù)提取2次；該條件下多酚物質(zhì)的提取率為5.33%，提取物中多酚含量為24.98%，回收率達(dá)98.4%。
　　關(guān)鍵詞：假煙葉樹(shù)；多酚；乙醇；提取工藝；優(yōu)化
　　中圖分類(lèi)號(hào)：Q946.82 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-060X（2015）08-0083-04
　　Abstract：This study investigated optimal conditions of extracting polyphenols from Solanum verbascifolium L.leaves with single factor and orthogonal experiment designs. The results showed that the effect of polyphenols extraction from Solanum verbascifolium L. leaves was influenced by such factors in the decreasing-degree order as concentration of ethanol> the ratio of raw materials to solvent > extraction time> extraction temperature. The optimum extraction conditions included the ethanol concentration at 40%， temperature at 80℃， ratio of solid to liquid at1：20， and extraction for1.5h and 2 times， under which the yield of polyphenols could reach as high as 5.33%， the content of the extract was 24.98% and the recovery rate of polyphenols was 98.4%.
　　Key words：Solanum verbascifolium L.； polyphenol； ethanol； extraction process； optimization
　　假煙葉樹(shù)（Solanum verbascifolium L.），又名野煙葉、土煙葉、山煙、野茄樹(shù)，屬茄科茄屬植物。生于海拔300～2 100 m的向陽(yáng)路邊、荒地，分布于福建、臺(tái)灣、廣東、海南、廣西、四川、貴州和云南等地；其根、葉、果均可入藥，具小毒，有解毒消腫、除風(fēng)止痛、涼血止血的功效[1-4]。Adam等[5]的研究表明，假煙葉樹(shù)中含有澳洲茄堿、澳洲茄邊堿、薯蕷皂苷元等生物活性成分。目前，對(duì)假煙葉樹(shù)的商業(yè)化開(kāi)發(fā)利用較少，基于民間對(duì)假煙葉樹(shù)的使用多為水提取物，而上述文獻(xiàn)中的化學(xué)物質(zhì)多為親脂性成分，它們?cè)谒�中溶解度很小。因此，有必要�?duì)假煙葉樹(shù)中的親水性成分做進(jìn)一步研究，以期明確其中的活性成分，為假煙葉樹(shù)的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。
　　前期的研究發(fā)現(xiàn)，假煙葉樹(shù)葉中含有多種多酚類(lèi)化合物，鑒于天然多酚類(lèi)化合物具有的抗氧化作用以及強(qiáng)化血管壁、促進(jìn)腸胃消化、降血壓降血脂、預(yù)防動(dòng)脈硬化和血栓形成、增強(qiáng)人體免疫力、抑制細(xì)菌和癌細(xì)胞生長(zhǎng)等多種功效[6-9]，筆者對(duì)假煙葉樹(shù)葉中的多酚物質(zhì)進(jìn)行了提取，并對(duì)提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，獲得活性成分含量較高的提取物，為假煙葉樹(shù)多酚物質(zhì)的后期開(kāi)發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)材料
　　供試假煙葉樹(shù)葉于7月采自廣東省假煙葉樹(shù)種植基地，為當(dāng)年新生莖葉，60℃恒溫干燥后粉碎備用。
　　供試試劑有色譜甲醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司），F(xiàn)olin-C試劑、沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品（成都曼思特生物技術(shù)有限公司，純度97%），95%食用乙醇（市購(gòu)）。
　　主要儀器設(shè)備有LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津公司）、WondasilTM Cl8色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、UV-2600 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（尤尼柯上海儀器有限公司）、RE-52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）、HH數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠）、SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科技工貿(mào)有限公司）、DHG-9146A型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。
　　1.2 試驗(yàn)方法
　　1.2.1 假煙葉樹(shù)葉乙醇提取物的HPLC檢測(cè) 取假煙葉樹(shù)葉原料用10倍甲醇60℃回流提取1 h，提取液進(jìn)行HPLC分析。色譜條件為：甲醇（B相），水（A相），梯度洗脫：0 min（B：5%，A：95%）→30 min（B：30%，A：70%），輸出波長(zhǎng)320 nm，流速1 mL/min，柱溫30℃。
　　1.2.2 假煙葉樹(shù)乙醇提取物中多酚含量的檢測(cè)方法 （1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精確稱(chēng)取104 mg沒(méi)食子酸于100 mL容量瓶中，經(jīng)水超聲溶解，冷卻定容得母液1.0088 mg/mL，分別取母液1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 mL于100 mL容量瓶中，加50 mL水，再加5 mL Folin-C試劑，搖勻后再加入15 mL 20%Na2CO3溶液，用水定容至刻度，于30℃反應(yīng)2 h后以空白樣品調(diào)零，在765 nm波長(zhǎng)下測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以沒(méi)食子酸質(zhì)量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）樣品含量的檢測(cè)。精確稱(chēng)取0.5 g假煙葉樹(shù)樣品，加入100 mL 60%乙醇，80℃回流提取2 h，過(guò)濾，濾液定容至250 mL，吸取0.5 mL溶液，于100 mL容量瓶中，其他操作與標(biāo)準(zhǔn)品相同，于765 nm處測(cè)定吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算假煙葉樹(shù)中多酚含量。

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