淺談微生物快速檢驗技術及臨床應用
發(fā)布時間:2018-06-24 來源: 人生感悟 點擊:
【中圖分類號】R446 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851(2018)03--02
隨著近幾年抗生素的濫用,導致了出現(xiàn)大量嚴重的耐藥菌株,加上新的病原微生物的出現(xiàn),給臨床診斷和治療帶來了極大的困擾。嚴峻的現(xiàn)實給病原微生物的檢測和診斷提出了更高的要求。世界衛(wèi)生組織(WHO)對臨床微生物實驗室提出:臨床微生物實驗室盡可能把目標集中在快速診斷方面。傳統(tǒng)的微生物檢驗法最突出的弱點是慢,難以實現(xiàn)快速診斷與治療,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究[1]。實現(xiàn)更準確、更快速的檢出與監(jiān)測病原體成為目前臨床微生物檢驗亟待解決的問題。隨著各種生物學技術的發(fā)展和相關學科的不斷發(fā)展,特別是免疫學、病原微生物耐藥性檢測技術、分子生物學技術、病原微生物的檢驗對近年來微生物的快速檢驗技術研究進展現(xiàn)狀作了一些探索,現(xiàn)在綜述如下。
一、免疫學方法在快速檢測微生物臨床檢驗中的應用
免疫學技術是利用特異性檢測病原微生物,簡化了病原微生物的鑒定步驟。該方法應用單克隆抗體結(jié)合各種形式的放射免疫分析、酶免疫分析以及熒光免疫分析、化學發(fā)光免疫分析、生物發(fā)光免疫分析等,足以免去細菌或病毒培養(yǎng)過程和完成微生物感染的快速診斷。這些方法已經(jīng)被廣泛應用于細菌的分型和鑒定,應用酶聯(lián)免疫技術制造技術有利于推動進一步簡化和準確。
二、細菌耐藥性監(jiān)控
與國外相比,我國細菌耐藥監(jiān)測工作還存在較大差距,一方面,國內(nèi)此項工作開展不夠普遍;另外有些監(jiān)測工作還缺乏規(guī)范性的連續(xù)性,我們不僅要進行各醫(yī)院的監(jiān)測,還要協(xié)助有關部門進行地區(qū)性監(jiān)測,甚至全國范圍的監(jiān)測,進一步與國際接軌和交流,鑒于目前耐藥性問題及耐藥性問題的日趨嚴重,應準確地做好常規(guī)的抗生素敏感試驗,并保存有關的菌種和數(shù)據(jù)以便進一步分析[2]。
三、分子生物學技術在快速檢測微生物中的應用
目前的病原微生物的鑒定已不再局限于外部形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理特性等一般檢驗上,而是立足于核酸水平的檢測上,使人們對微生物的認識逐漸轉(zhuǎn)換為微生物的檢測也從生化、免疫方法轉(zhuǎn)向基因水平檢測。在眾多的檢測技術中,核酸雜交和聚合酶鏈反應已應用于病原菌的快速檢測,特別是基因芯片技術給微生物學檢測帶來新的革命。病原微生物有很多時候出現(xiàn)多重耐藥,基因芯片可對臨床用藥和新藥開發(fā)具有指導意義,但目前基因芯片技術限制了分子檢測技術在臨床病原微生物中的應用[3]。
四、分子生物傳感器在快速檢測微生物中的應用
分子生物傳感器是將新興的傳感器技術和分子診斷技術相結(jié)合而成的一種新技術,為現(xiàn)代臨床診斷發(fā)展的一個新方向。生物傳感器在感染類疾病診斷、藥物篩選等領域獲得了廣泛的應用。其中臨床中用于病原體檢測的DNA生物傳感器最為常見。據(jù)報道,最新制成的生物傳感器,僅需20s時間即可檢測出微量SARS病毒、天花病毒及炭疽桿菌等的存在,從而達到早期、快速診斷的目的[4]。
五、病原微生物的自動化系統(tǒng)在快速檢測微生物中的應用
近年來,隨著計算機技術的不斷發(fā)展,對病原微生物的鑒定技術朝著微量化、系列化、自動化的方向發(fā)展,從而開辟了微生物檢測與鑒定的新領域。最有代表性的是AMS微生物自動分析系統(tǒng),可實現(xiàn)基本同常規(guī)檢測鑒定,單檢測所需時間4~8h。
六、加強與臨床的聯(lián)系,做到信息暢通
各醫(yī)院微生物實驗室的檢驗醫(yī)師應和臨床醫(yī)護人員一道,根據(jù)微生物檢驗規(guī)范的規(guī)定,研討和制定本院微生物標本采集、保存和運送的具體要求。要廣泛宣傳,取得支持,認真實施。要建立健全標本驗收制度,對于不合格的標本要堅決退回,說明原因,要求重送。關于標本的采集要求,要向醫(yī)護人員做一些深入細致的宣教。如懷疑病人患有感染性系統(tǒng)性炎癥反應綜合征,需要采血進行培養(yǎng),有相當一些醫(yī)生不分析病人的發(fā)熱規(guī)律,不考慮是否用過抗生素,只采1份血送檢,結(jié)果常常培養(yǎng)陰性。這里強調(diào)的是“主動”參與對話,作為檢驗人員,你應是檢驗結(jié)果的主導者,你應知道這個結(jié)果是陽性、陰性、有價值或無價值、是否要重做或繼續(xù)觀察。當然,臨床醫(yī)生也有不懂得新的檢測項目或者少用的生澀項目,這些都有需要你去主動與臨床聯(lián)系,向他們說明這一檢驗結(jié)果的價值和意義,這樣做應該說明你對結(jié)果很有主見,很有信心,你主動解釋,應該是你的自信心的表現(xiàn),同樣如此,自信心必須建立在堅實的知識面的基礎上。臨床醫(yī)生在開化驗單時應告訴實驗室人員有關患者的推測性診斷,以便使試驗人員能據(jù)此選擇合理的檢驗程序和試驗方法,并能指導臨床正確采集恰當?shù)臉吮,改變過去那種臨床送什么標本、檢查哪些項目全都由醫(yī)生說了算的局面[5]。當實驗室開始有結(jié)果時,必須及時通知臨床醫(yī)生,以便讓他們隨時評價診斷和治療方案。另外實驗室人員對危重和疑難癥患者,需要親自去進行床邊觀察,參加病例討論,接受臨床醫(yī)生就診治方面的咨詢;要參加感染性疾病的會診,討論有關診治方面的問題,提出有效方案,尤其對檢出細菌的種類和耐藥情況作出說明,提出防止耐藥性和醫(yī)院感染的警報和措施。
總之,微生物學檢驗技術應在提高微生物檢驗的技術水平上下功夫,快速地做好追蹤和控制,有利于微生物技術在臨床醫(yī)學上更好的服務。
參考文獻
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