【摘要】目的 ：了解炮制對(duì)柴胡藥材中4種柴胡皂苷的影響。方法 ：采用高效液相色譜法，對(duì)柴胡不同炮制品提取物中組分進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果： 經(jīng)炮制后，4種柴胡皂苷含量出現(xiàn)明顯變化。結(jié)論 ：高效液相色譜法方法操作簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性良好，在柴胡及炮制品中柴胡皂苷含量測(cè)定中具有重要的指導(dǎo)作用，能為其質(zhì)量控制提供可參考依據(jù)。
　　【關(guān)鍵詞】炮制；柴胡；柴胡皂苷
　　【中圖分類(lèi)號(hào)】R242【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-6851（2014）08柴胡屬于臨床上的一種常用中藥，主要炮制品包括三類(lèi)：一是生柴胡，二是醋柴胡，三是酒柴胡。在臨床上，其炮制品功效具有明顯差異，生柴胡具有很強(qiáng)的升散作用，解表退熱功效顯著；醋柴胡具有止痛、疏肝和血之功效；酒柴胡升散散邪作用顯著[1]�，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，柴胡中柴胡皂苷a、d為關(guān)鍵有效成分，對(duì)柴胡進(jìn)行炮制，發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷b1、b2含量存在上升現(xiàn)象，可作為質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)[2]。為了深入探究炮制對(duì)柴胡藥材中4種柴胡皂苷的影響，本試驗(yàn)主要采用高效液相色譜法，構(gòu)建酒柴胡、醋柴胡、生柴胡中柴胡皂苷a、b1、b2、d含量測(cè)定法，并觀察4種柴胡皂苷含量變化狀況，相關(guān)報(bào)告如下。
　　1儀器、試藥與方法
　　1.1 儀器及試藥
　�。�1）儀器：雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、高效液相色譜儀（Waters 600型）、色譜工作站（Empower型）、超聲波清洗器（濟(jì)寧豐鑫超聲設(shè)備有限公司，KQ-50DB型）、電子分析天平（_北京京科瑞達(dá)科技有限公司，METTLER-AE 240型）、粉碎機(jī)（江陰市永昌機(jī)械有限公司，F(xiàn)W177 型）；（2）試藥：柴胡藥材（購(gòu)于當(dāng)?shù)厮幉氖袌?chǎng)，經(jīng)試驗(yàn)鑒定為北柴胡干燥根）、柴胡皂苷a、b1、b2、d（分離制備，經(jīng)H-NMR鑒定結(jié)構(gòu)并測(cè)定均純度>97%）、乙腈、米醋、黃酒（江西省榮華調(diào)味品廠）。酒柴胡、醋柴胡制備借鑒1988版《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》中的炮制通法，炮制品成品率依次為94.5%、96.1%。
　　1.2 一般方法
　　1.2.1 色譜條件
　�。�1）Hypersil ODS色譜柱：4.6mm×250mm；（2）流速：1.0mL/min-1；（3）流動(dòng)相：乙腈-水、梯度洗脫；（4）波長(zhǎng)：210nm及254nm；（5）柱溫：30℃；（6）進(jìn)樣量：10μL；（7）柴胡皂苷理論塔板數(shù)：a>7000，b1>6500，b2>5000，d>4000。
　　1.2.2 供試品溶液制備方法
　　擇取柴胡炮制品，待烘干后粉碎，取70目粉末（1.0g）烘干達(dá)至恒重并置入具塞三角瓶中，添入50mL、%氨性甲醇溶液，待浸潤(rùn)30min后超聲60min，補(bǔ)充甲醇靜置取25mL上清液并放置于蒸發(fā)皿中，待濃縮至干后移至量瓶（5.0mL）中，通過(guò)微孔濾膜濾過(guò)可獲取。
　　1.2.3 對(duì)照品溶液制備方法
　　稱(chēng)取各柴恒重胡皂苷對(duì)照品，置于量瓶（10mL）中，待超聲溶解后稀釋搖勻，獲取0.18g/L-1柴胡皂苷a、20.09g/L-1柴胡皂苷b2、10.10g/L-1柴胡皂苷b1、0.19g/L-1柴胡皂苷d。
　　1.2.4 線性關(guān)系分析
　　吸取柴胡皂苷d、a對(duì)照品溶液20、15、12、8、4、1μL及柴胡皂苷b2、b1對(duì)照品溶液10、8、4、2、1μL，將液相色譜儀注入其中，觀察峰面積變化，并以此為縱坐標(biāo)，取進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，獲取柴胡皂苷a、b1、b2、d回歸方程。
　　1.2.5 精密度、重復(fù)性及加樣回收率實(shí)驗(yàn)
　　取1份醋柴胡樣品，進(jìn)行供試品溶液制備并測(cè)定峰面積。同時(shí)，取5份醋柴胡樣品，吸取10.0μL供試品溶液，進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)。另外，稱(chēng)取9份醋柴胡粉末，0.5g/份，劃分為3組，依據(jù)供試品溶液制備方法進(jìn)行操作，計(jì)算加樣回收率。
　　2結(jié)果
　　2.1 精密度、重復(fù)性及加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　（1）精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果：柴胡皂苷a、b1、b2、d峰面積RSD值分別為1.5%，2.1%、0.8%、1.1%，提示精密度處于良好狀態(tài)；（2）重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果：RSD值依次為1.5%、2.1%、1.9%、1.7%，提示重復(fù)性良好；（3）加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果：RSD值依次為1.31%、0.52%、1.15%、1.25%。
　　2.2 柴胡皂苷a、b1、b2、d測(cè)定結(jié)果
　　于生柴胡中，柴胡皂苷a、b1、b2、d依次為2.644g/L-1、0.048g/L-1、0.122g/L-1、2.096g/L-1，于醋柴胡中，依次為1.771g/L-1、0.280g/L-1、0.168g/L-1、1.251g/L-1，于酒柴胡中，分別為3.080g/L-1、0.980g/L-1、0.531g/L-1、2.740g/L-1，表明不同柴胡炮制品中皂苷含量存在明顯差異。
　　3討論
　　通常而言，在炮制過(guò)程中，柴胡存在結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。譬如柴胡皂苷a極其容易轉(zhuǎn)變?yōu)閎1，而d易變?yōu)閎2。從某種角度上來(lái)講，以往主要以柴胡皂苷a、d含量為關(guān)鍵質(zhì)量評(píng)定指標(biāo)，但其評(píng)價(jià)體系無(wú)法完全表達(dá)柴胡炮制品的品質(zhì)。本文研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同柴胡炮制品中皂苷含量存在明顯差異，醋制品中柴胡皂苷d、a含量較生品低，其對(duì)應(yīng)降解產(chǎn)物b1、b2含量且較生品高，多由于a、d結(jié)構(gòu)處于不穩(wěn)定狀態(tài)，于炮制中，基于加熱條件下，再加上米醋中酸性物質(zhì)影響下，極其容易出現(xiàn)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象，轉(zhuǎn)變?yōu)椴窈�皂苷b1、b2，而柴胡皂苷b1、b2藥理作用顯著[3]。在醋制過(guò)程中，柴胡皂苷a、d降解產(chǎn)物不僅局限于柴胡皂苷b1、b2，其降解產(chǎn)物可能存在降解過(guò)程，具體機(jī)制尚待研究。于酒柴胡中，柴胡皂苷a、b1、b2、d含量高于醋柴胡及生柴胡。究其根源，黃酒成分較為復(fù)雜，伴有葡萄糖、麥芽糖、糊精、含氮物、琥珀酸、氨基酸及甘油等，在酒制中易激活植物體內(nèi)酶，促使柴胡皂苷發(fā)生轉(zhuǎn)變[4]。
　　綜上所述，炮制對(duì)柴胡藥材中4種柴胡皂苷具有重要的影響，其具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步探究。
　　參考文獻(xiàn)
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