[摘要] 該實(shí)驗(yàn)主要研究了超微粉碎技術(shù)對(duì)三七藥材粉碎效果及有效成分含量的影響。以三七微粉粒徑大小為指標(biāo)，利用馬爾文粒徑測(cè)定儀測(cè)定粉碎不同時(shí)間所得到三七微粉的粒徑并采用HPLC-ELSD對(duì)三七超微粉碎前后，人參皂苷Rg₁，Rb₁和三七皂苷R₁的含量進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果顯示超微粉碎2 h的藥材粉末粒徑均一，達(dá)到了細(xì)胞級(jí)粉碎，D₅₀約為9.599 μm，粒徑分布為單峰，粉碎0.5，1，1.5 h的粒徑分布均為雙峰；超微粉碎0.5，1，1.5，2 h所得三七微粉中3種皂苷類成分總量分別為7.7%，7.5%，7.5%，8.3%，普通粉碎所得三七藥粉中的3種皂苷總量約為5.0%，通過以上實(shí)驗(yàn)可以看出：超微粉碎與否對(duì)三七粉粒徑均勻度及其主要成分含量有很大影響；與普通粉碎藥粉相比，超微粉碎2 h藥粉粒徑較為均一，3種皂苷含量明顯增加，為臨床減少三七用藥劑量及合理利用資源提供依據(jù)；但其皂苷總量與粉碎時(shí)間不成正比關(guān)系，可以結(jié)合粒徑大小需求選擇不同的粉碎時(shí)間。
　　[關(guān)鍵詞] 皂苷；超微粉碎；粒徑；含量
　　[收稿日期] 2013-12-27
　　[基金項(xiàng)目] 2009年中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)（200907001-5）；北京市共建項(xiàng)目專項(xiàng)
　　[通信作者] 李慧，博士，研究員，研究方向?yàn)橹兴幮聞┬脱芯颗c新藥開發(fā)，Tel：（010）64014411-2957， E-mail：lihuiyiren@163.com
　　[作者簡(jiǎn)介] 王艷萍，碩士研究生，E-mail：mengtouxiaozi@163.com
　　三七為五加科人參屬多年生草本植物三七Panax notoginseng （Burk.） F.H.chen的干燥根和根莖[1]，又名參三七、田七、土三七、血山草等，具有散瘀止血、消腫止痛等功效，主要應(yīng)用于各種出血證，被現(xiàn)代中藥藥物學(xué)家稱為“參中之王”，現(xiàn)代藥理研究表明，三七對(duì)血液、心血管、神經(jīng)、免疫等系統(tǒng)等均具有廣泛的作用，在臨床上廣泛應(yīng)用的名貴藥材之一[2]。
　　超微粉碎是利用機(jī)械或流體動(dòng)力的方法克服固體內(nèi)部凝聚力使之破碎。與傳統(tǒng)粉碎相比，超微粉碎可使中藥材細(xì)胞破壁率達(dá)95%以上并且能打碎細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)外的有效成分充分暴露出來(lái)，提高溶出率；中藥超微粉粒徑一般在75 μm以下，明顯提高粉末的均勻性，從而使制劑的質(zhì)量得到改善。近年來(lái)，超微粉碎技術(shù)主要應(yīng)用于一些貴重藥材或者稀少的中藥材品種上[3-4]，減少資源浪費(fèi)，提高藥物吸收率[5-6]。本研究主要是對(duì)三七藥材進(jìn)行不同時(shí)間超微粉碎，同時(shí)采用HPLC-ELSD測(cè)定3種皂苷類成分的含量，研究超微粉碎技術(shù)對(duì)三七藥材粒徑及有效成分含量的影響，為臨床減少三七用藥劑量及合理利用資源提供依據(jù)。
　　1 材料
　　WZJ-16B1振動(dòng)式超微粉碎機(jī)（濟(jì)南倍利粉技術(shù)工程有限公司）；安捷倫1200高效液相色譜儀（美國(guó)HP公司）；ELSD2000ES蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（Alltech公司）；Mastersizer 2000激光衍射法粒度儀結(jié)合干法進(jìn)樣器Scirocco 200（英國(guó)馬爾文儀器有限公司）；無(wú)污染顎式破碎機(jī)（武漢微型電機(jī)廠）；DFy-600 g粉碎機(jī)（溫嶺市林大機(jī)械有限公司）。
　　三七藥材購(gòu)自西安盛興中藥飲品有限責(zé)任公司，經(jīng)中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所李先端研究員鑒定為五加科人參屬多年生草本植物三七P. notoginseng （Burk.） F.H.chen的干燥根和根莖；人參皂苷Rg₁，Rb₁，三七皂苷R₁（批號(hào)分別為110703-201128，110704-201223，110745-200617），純度大于98%，均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；乙腈（Fisher公司）為色譜純；自制高純水，甲醇為分析純。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 三七藥材普通粉與超微粉的制備
　　2.1.1 三七普通粉的制備 稱取適量三七藥材，烘干，用無(wú)污染顎式破碎機(jī)破碎，呈小塊狀。再將破碎的三七藥材用DFy-600g粉碎機(jī)粉碎后得到三七粗粉，即三七普通粉。
　　2.1.2 三七超微粉的制備 按照2.1.1項(xiàng)下制備三七普通粉，分為4份，再分別用振動(dòng)式超微粉碎機(jī)粉碎0.5，1，1.5，2 h，用Mastersizer 2000激光衍射法粒度儀測(cè)定其粒徑分布[4]，重復(fù)測(cè)量3次，統(tǒng)計(jì)不同粉碎時(shí)間得到的三七粉D₅₀（中位粒徑）、D₉₀（90%粒徑值）[7]的均值，結(jié)果見表1，各時(shí)間點(diǎn)的粒徑分布見圖1。
　　2.2 三七超微粉中人參皂苷Rg₁，Rb₁，三七皂苷R₁的含量測(cè)定
　　2.2.1 色譜條件的考察 分別采用HPLC紫外檢測(cè)器和蒸發(fā)光檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定三七超微粉的樣品，結(jié)果見圖2，與HPLC-UV相比，HPLC-ELSD分離效果好，避免了波長(zhǎng)在203 nm時(shí)紫外末端吸收差，基線漂移等問題，因此選用HPLC-ELSD的色譜條件來(lái)進(jìn)行含量測(cè)定。
　　2.2.2 色譜條件 MERCK RP-C₁₈色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相乙腈（A）-水（B），梯度洗脫：0～20 min，21%～50% A；流速1 mL·min^-1；漂移管溫度105 ℃。
　　2.2.3 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取三七皂苷R₁、人參皂苷Rg₁及人參皂苷Rb₁對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL分別含上述成分0.2，0.5，0.4 mg的混合對(duì)照品溶液，即得，見圖3。

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