摘要：為研究再造煙葉生產(chǎn)廢水處理回用系統(tǒng)產(chǎn)生的回用水對再造煙葉產(chǎn)品的安全性，對用凈化回用水生產(chǎn)的再造煙葉產(chǎn)品進行了細菌回復(fù)突變試驗（Ames試驗）、中性紅細胞毒性試驗以及體外細胞微核試驗3項體外毒理學(xué)測試。結(jié)果表明，再造煙葉生產(chǎn)廢水零排放系統(tǒng)處理后的凈化回用水適用于再造煙葉產(chǎn)品生產(chǎn)，為生產(chǎn)廢水零排放系統(tǒng)的工業(yè)化應(yīng)用提供了技術(shù)支持。
　　關(guān)鍵詞：再造煙葉；回用水；安全性評價；體外毒理學(xué)測試
　　中圖分類號：S572；X795 文獻標識碼：A
　　文章編號：0439-8114（2019）03-0102-04
　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.03.027 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標識碼（OSID）：
　　Abstract： In order to study the safety of recycle-water produced by reconstituted tobacco production wastewater treatment and reuse systems for the safety of reconstituted tobacco products， in this paper， there were three in vitro toxicology tests，the bacterial reverse mutation assay（Ames test），neutral red uptake assay， and in vitro micronucleus assay，which performed on reconstituted tobacco products produced from purified water. The results showed that the purified water reused after the zero discharge system of reconstituted tobacco production wastewater was suitable for the production of reconstituted tobacco products. The test results provide technical support for the industrial application of the zero discharge system of production wastewater.
　　Key words： reconstituted tobacco； recycle-water； safety evaluation； in vitro toxicology test
　　再造煙葉生產(chǎn)具有水耗高、廢水排放量大的特點，白水、蒸氣冷凝水及設(shè)備冷卻水回用在一定程度上可以實現(xiàn)廢水回收利用，進而減少廢水排放量和廢水處理系統(tǒng)的處理負荷，但回用水量有限[1-4]。為實現(xiàn)再造煙葉生產(chǎn)廢水零排放，項目組開展了再造煙葉生產(chǎn)線各工藝段用水、生產(chǎn)廢棄物特性的分析研究，開發(fā)一套基于MBR+RO組合處理、氧化+吸附+絮凝、UF/NF/RO濃水處理回收技術(shù)、高鹽溶液濃縮技術(shù)的再造煙葉生產(chǎn)廢水處理回用系統(tǒng)，應(yīng)用于再造煙葉生產(chǎn)；實現(xiàn)廢水處理能力達到3 000 m3/d，RO濃水再處理后水質(zhì)達到國家污水綜合排放標準（GB 8978-1996）中的一級A標準。
　　體外毒理學(xué)測試是用來測定毒性物質(zhì)短時期內(nèi)對細胞或者DNA的潛在危害和損傷，具有快速、價格低廉、易于操作等特點[5-7]。煙草行業(yè)對于安全性高度重視，體外毒理學(xué)測試也就成為煙草制品健康風(fēng)險評估程序中一個必不可少的部分[8-13]。
　　回用水雖然能夠降低生產(chǎn)排放量，但是對再造煙葉產(chǎn)品的安全性還是未知的，研究用再造煙葉生產(chǎn)廢水處理回用系統(tǒng)產(chǎn)生的回用水，開展體外毒理學(xué)測試，以期評價回用水對再造煙葉產(chǎn)品的安全性。
　　1 材料與方法
　　1.1 材料
　　試驗樣品為濾棒，編號為WSDZ、WSHT。
　　1.2 主要儀器
　　酶指標（Bio-Rad Model 680）；顯微鏡（Nikon ECLIPSE 90i）；隔水式恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒）；二級生物安全柜（蘇州安泰）；水浴搖床（德國Vivo）。
　　1.3 方法
　　1.3.1 3項體外毒理學(xué)測試方法 細菌回復(fù)突變試驗（Ames試驗）、中性紅細胞毒性試驗、體外細胞微核試驗分別按YQ 2-2011、YQ 3-2012、YQ 4-2013方法測試。
　　1.3.2 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)分析。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 Ames試驗
　　表1是菌株TA98（+S9）煙氣總粒相物樣品Ames試驗檢測結(jié)果，表2是菌株TA98（-S9）煙氣總粒相物樣品Ames試驗檢測結(jié)果，表3是菌株TA100（+S9）煙氣總粒相物樣品Ames試驗檢測結(jié)果，表4是菌株TA100（-S9）煙氣總粒相物樣品Ames試驗檢測結(jié)果。從表1和表2可以看出，在TA98（+S9）和TA98（-S9）檢測體系中，自發(fā)回變組、溶劑對照組、陽性對照組回復(fù)突變菌落數(shù)均在正常范圍內(nèi)，表明該TA98菌株檢測體系正常。
　　受檢的2個卷煙的煙氣總粒相物樣品在TA98（+S9）檢測體系下，當檢測劑量為50 μg/皿，所誘發(fā)的回復(fù)菌落數(shù)均未達到自發(fā)回變的2倍以上，表明在該劑量下卷煙的煙氣總粒相物沒有致突變性；在檢測的劑量為100～500 μg/皿時，所誘發(fā)的回復(fù)菌落數(shù)己達到自發(fā)回變的2倍以上，表明在TA98（+S9）檢測體系中，卷煙的煙氣總粒相物經(jīng)體外代謝活化系統(tǒng)激活后可引起移碼突變，具有致突變性。采用SPSS軟件的One-way ANOVA對2個受試卷煙煙氣總粒相物誘發(fā)的回復(fù)菌落數(shù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，2個受試卷煙間無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

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