摘要：目的 比較加速溶劑萃取、超聲提取和索氏提取法3種常用提取方法對中藥材中殘留農(nóng)藥的提取差異。方法 用加速溶劑萃取、超聲提取和索氏提取分別對含有已知農(nóng)藥殘留的中藥材進行殘留農(nóng)藥提取，經(jīng)濃硫酸磺化、弗羅里硅土柱凈化和凝膠滲透色譜3種凈化方法，采用HP-5毛細管色譜柱分離樣品，氣相色譜-電子捕獲檢測器測定其農(nóng)藥殘留的含量，外標法定量。結果 超聲提取的提取率顯著低于索式提取、加速溶劑萃取（P<0.05），加速溶劑萃取與索式提取的提取率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），3種凈化方法回收率兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結論 加速溶劑萃取的提取率最高，其次為索氏提取，超聲提取最低。檢測者應根據(jù)需要選取不同的提取方法。
　　關鍵詞：農(nóng)藥殘留；加速溶劑萃取；超聲提取法；索氏提取法；中藥材
　　中圖分類號：R284.1 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2014）04-0089-04
　　中藥質量的認識、評價和質量控制是保證中藥安全性和有效性的重要手段，在中藥研究、生產(chǎn)及臨床應用過程中具有非常重要的作用。中藥農(nóng)藥殘留污染具有普遍性，尤其是有機氯農(nóng)藥，農(nóng)藥殘留超標事件對中藥出口造成了嚴重的不良影響。所以應該加快殘留農(nóng)藥檢測方法和限量標準的研究工作，及時制訂管理法規(guī)，加大管理執(zhí)法力度，使相關企業(yè)重視并主動避免農(nóng)藥殘留超標的現(xiàn)象出現(xiàn)[1]。
　　各種標準、文獻[2-6]中檢測農(nóng)藥殘留的提取方法各不相同，目前大多數(shù)檢測方法采用添加回收率[7-12]來衡量目標農(nóng)藥是否提取完全，但添加的農(nóng)藥和藥材本身吸收的農(nóng)藥狀態(tài)差異很大，采用添加回收的方法不能明確地反映對藥材本身吸收的農(nóng)藥的提取率。本研究以含有已知農(nóng)藥殘留的中藥材為研究對象，選取常用的3種提取方法和3種凈化手段進行不同的組合，對同一樣品進行不同前處理方法的農(nóng)藥殘留檢測，以此對比加速溶劑萃�。ˋSE）、超聲提取（USE）、索氏提�。║E）3種不同方法間的提取率差異，從而為不同檢測目的工作人員選擇提取方法提供依據(jù)。
　　1 儀器與試藥
　　美國Agilent 7890氣相色譜儀-電子捕獲檢測器（GC-ECD），HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 ?m）與DB1701石英毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 ?m）；美國Dionex ASE-350加速溶劑萃取儀，萃取池體積10 mL；德國LCTech GPC-Ultra凝膠滲透色譜儀，凈化柱：400 mm×25 mm glass column，填料50 g Bio-Beads Type S-X3 200-400；浙江省永康市金穗機械制造廠的JSP-750A高速萬能粉碎機；瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司PL203/01電子天平；北京天鵬有限公司T-150超聲波清洗器；Heidolph公司LABORATA-4000旋轉蒸發(fā)儀；鄭州長城科工貿(mào)有限公司SHB-B型循環(huán)水式多用真空泵。
　　人參（產(chǎn)地吉林，批號bzrs201008-50）、黃芪（產(chǎn)地內(nèi)蒙，批號bzhq201010-45）、白菊（產(chǎn)地河北，批號bzbj201003-38），購于亳州藥材市場。Florisil硅土柱（1000 mg，6 mL，美國Agilent公司），正己烷（色譜純，F(xiàn)isher公司），乙酸乙酯、石油醚、丙酮、無水硫酸鈉、正己烷、濃硫酸（分析純，北京化工廠），乙腈（分析純，北京化工廠）。農(nóng)藥標準品：六六六（BHC）的3個異構體α-BHC（批號9085027）、β-BHC（批號9086033）、γ-BHC（批號9088040），六氯苯（hexachlorobenzene，批號1912585），五氯硝基苯（quintozine，批號200903），pp’-DDE（批號9081019），反式氯菊酯（trans-permethrin，批號80104），純度均>99.0%，購于國家標準物質研究中心。
　　2 方法
　　2.1 提取方法
　　將樣品在自然條件下陰干后粉碎，過0.24 mm孔徑的樣品篩，待用。
　　2.1.1 加速溶劑萃取 準確稱取樣品1.0 g、硅藻土1.0 g（硅藻土起到分散劑的作用），混勻，置于10 mL的萃取池中，待測。ASE系統(tǒng)壓力1500 psi，溫度100 ℃，加熱時間5 min，靜態(tài)萃取時間5 min，沖洗體積為60%，氮吹60 s，循環(huán)2次。提取液在旋轉蒸發(fā)儀40 ℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　2.1.2 超聲提取 準確稱取1.0 g樣品與1.0 g無水硫酸鈉，混勻，置于100 mL具塞三角瓶中，加入提取溶劑30 mL，冰浴提取15 min，將提取液過濾至100 mL茄形瓶中，重復提取1次，合并提取液并在旋轉蒸發(fā)儀40 ℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　2.1.3 索氏提取 準確稱取樣品1.0 g與無水硫酸鈉1.0 g，混勻，置于濾紙包中，放入索氏提取器中，加80 mL提取溶劑（索氏提取器中30 mL，100 mL圓底燒瓶中50 mL），65 ℃水浴提取30 min，約回流6次，將提取液轉移至100 mL茄形瓶中，在旋轉蒸發(fā)儀40 ℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　2.2 凈化方法
　　2.2.1 磺化法 將濃縮后的殘渣用正己烷定量轉移至具塞刻度試管中，定容至5 mL，再用移液槍加入1 mL濃硫酸，渦旋1 min，3000 r/min離心10 min，取上清液，進氣相色譜儀測定。
　　2.2.2 固相萃取法 將濃縮后的殘渣，加入1 mL正己烷溶解，將裝有1 mL左右高度無水硫酸鈉的弗羅里硅土柱置于固定架上，先用10 mL正己烷-乙酸乙酯（85∶15）進行淋洗，當淋洗液近干時快速移入樣品濃縮液，用2 mL淋洗液多次充分洗脫茄形瓶并轉入柱中，用50 mL茄形瓶收集洗脫液20 mL，在40 ℃水浴旋轉濃縮至近干。加入1 mL正己烷（色譜純）溶解，進氣相色譜儀測定。

相關熱詞搜索：中藥材 農(nóng)藥 殘留 提取 方法